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靈芝多糖

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江記靈芝靈芝多糖

靈芝多糖(Ganoderma lucidum Polysaccharide)目前已分離到的有200多種,其中大部分為β –葡聚糖,少數為α –葡聚糖,多糖鏈由三股單糖鏈構成,是一種螺旋狀立體構形物,其立體構形和DNA、RNA相似,螺旋層之間主要以氫鍵固定,分子量從數百到數十萬,除一小部分小分子多糖外,大多不溶于高濃度酒精,在熱水中溶解,大多存在于靈芝細胞內壁。靈芝多糖大多為異多糖,即除含有葡萄糖外,大多還含有少量阿拉伯糖木糖巖藻糖鼠李糖半乳糖等其他單糖。 靈芝多糖在國外亦在進行廣泛、深入研究。

[靈芝多糖的醫療保健價值]

靈芝多糖是靈芝中最有效的成分之一,因此,也特別受到醫藥科技工作者的重視,研究報道也最多。現知靈芝多糖有廣泛的藥理活性,能提高機體免疫力,提高機體耐缺氧能力,消除自由基,抑制腫瘤、抗輻射,提高肝臟骨髓血液合成DNA、RNA、蛋白質能力,延長壽命,靈芝多糖還具有刺激宿主非特異性抗性、免疫特異反應以及抑制移植腫瘤生理活性的特性。多糖分子量大于1×104時顯示強抑制腫瘤活性,活性強弱還與多糖鏈分叉的程度及支鏈上羥基的數量有關。對心血管疾病氣喘、過敏、神經衰弱胃熱等有顯著效果,同時還具有降血壓、降血脂、解血瘀、改善血液循環皮膚美容等作用。靈芝的多種藥理活性大多和靈芝多糖有關。

[靈芝多糖抑制腫瘤3種手段]

1.通過提高機體免疫力,使免疫細胞能在腫瘤發生早期把其殺死、吞噬;

2.提高血小板纖維蛋白的形成能力,大量的纖維蛋白能將早期的腫瘤腫塊緊緊包裹,使它與外界隔絕,杜絕腫瘤的營養,從而使它長期處在休眠潛伏狀態;

3.降低腫瘤細胞表面電荷,腫瘤細胞表面電荷要比正常細胞高好幾倍,表面電荷的降低,腫瘤細胞的分裂調節基因就能啟動,從而可抑制腫瘤的無限、快速分裂能力.目前,靈芝多糖已被用作治療腫瘤的藥物之一。  

靈芝多糖的提取方法

一、靈芝菌絲體多糖的提取

(一)材料

1.菌種:湖南省食用菌研究所提供的韓國靈芝母種。

2.種子培養基:玉米粉2% 大米粉2%

蔗糖2% 磷酸二氫鉀o.1g

硫酸鎂0.05% ph值自然

3.發酵培養基:麥麩浸出液10% 葡萄糖2%

硫酸銨0.2%

磷酸二氫鉀0.2% ph值自然

(二)方法

1.種子培養:

2.發酵培養生產菌絲體

3.測定干、濕菌絲體。

將發酵液進行離心,然后取其沉淀物,加人60%蔗糖,進行高速(3000轉/分)密度梯度離心5分鐘,取上層菌絲體,洗凈蔗糖再壓干,即得濕菌體,然后再將濕菌體于高溫下烘干即為干菌體。分別稱取其重量。

4.多糖的提取。

菌絲體預處理。取適量的靈芝濕菌體,用乙醇等有機溶劑進行處理,以除去濕菌體中的脂類物質,同時使糖苷酶失去活性,防止多糖的降解。

(2)用熱水提取多糖。取上面經預處理的靈芝濕菌體,放人1:20的熱水(95℃)中浸提,一次小時,連續浸提3次,合并3次的水浸提液減壓、濃縮至一定體積,再用3倍體積的95%乙醇混合,靜置10-12小時,再離心,最后加入75%的乙醇反復洗滌,以沉淀多糖。此沉淀物為粗多糖,其中混雜有蛋白質、色素、低聚糖等小分子雜質,一般要經過純化

(3)多糖的純化,去蛋白質和deae纖維素柱層析。去蛋白質一般采用sevag法:加入0.2倍多糖溶液體積的氯仿和0.04倍體積的正丁醇混合振蕩半小時進行分離,直至氯仿與水的界面無沉淀為止,且要重復處理2-3次才能有效除去多糖中的蛋白質。多糖純化一般采用硼酸型deae纖維素柱層析法:取脫蛋白后的多糖,分別以0.025mol/l、0.1mol/l的硼砂,0.1mol/l的氫氧化鈉溶液進行洗脫,然后用0.2%恿銅硫酸比色測定吸收度,收集有多糖的洗脫液,再濃縮脫鹽即得所需的多糖。

(4)多糖純度的鑒定。

可用電泳法進行鑒定,如果存在單一帶,說明為純多糖。

5.多糖與多糖中蛋白質含量的測定:

取一定量菌絲體粗多糖,加水煮沸溶解,用sevag方法脫去蛋白考馬斯亮蘭法測其粗多糖中蛋白質和多糖的含量。測得菌絲體中粗多糖含17.01%、多糖含5.43%、蛋白質含量2.16%。  

靈芝子實體多糖的提取

(一)材料

1.菌種:韓國靈芝栽培種。

2.子實體栽培生產料:木屑78%,米糠20%,蔗糖1%,

石膏1%,ph值自然。

(二)方法

1.子實體栽培。

2.靈芝子實體預處理。

3.子實體多糖的提取。

取適量的靈芝子實體,搗碎成粉末,用80目篩過篩,然后用熱水提取法進行提取。具體操作同菌絲體多糖的提取。提取出的粗多糖含有色素、蛋白質等小分子雜質,也須除去。

4.去除蛋白質和色素。

子實體粗多糖去除蛋白質也采用se陰法。去除色素,目前尚未發現很理想的方法。一般用乙醇進行反復沖洗,但效果不很理想。

5.多糖純度的鑒定。

同菌絲體多糖純度的鑒定。

6.子實體粗多糖、多糖及蛋白質含量的測定。

具體方法同菌絲體多糖及蛋白質含量的測定。測得子實體中粗多糖7.5%、多糖1.5%,蛋白質0.6%,其含量均低于菌絲體中的含量。可見菌絲體階段就形成了靈芝多糖的有效成分,為靈芝液體深層發酵生產菌絲體提供了科學依據。

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