病理學(xué)/新開(kāi)展的腫瘤檢查方法

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病理學(xué)

腫瘤
- 腫瘤的病理學(xué)檢查方法
  - 常規(guī)的病理形態(tài)學(xué)檢查
  - 新開(kāi)展的腫瘤檢查方法

1．免疫組織化學(xué)檢查 免疫組化是最近10多年來(lái)迅速發(fā)展起來(lái)的一門新興技術(shù)。它已被廣泛運(yùn)用腫瘤研究和診斷，其原理是利用抗原與抗體的特異性結(jié)合反應(yīng)來(lái)檢測(cè)組織中的未知抗原或者抗體，主要是腫瘤相關(guān)抗原（腫瘤分化抗原和腫瘤胚胎抗原），借以判斷腫瘤的來(lái)源和分化程度，協(xié)助腫瘤的病理診斷和鑒別診斷。目前常用的染色方法有過(guò)氧化物酶－抗過(guò)氧化物酶法，即PAP法（peroxidaseantiperoxidase technique）和卵白素－生物素－過(guò)氧化物酶復(fù)合物法，即ABC法(avidin－biotin－peroxidase complex technique)。利用免疫組織化學(xué)方法已經(jīng)可以對(duì)許多常規(guī)方法難以判斷其來(lái)源的腫瘤加以鑒別。例如檢測(cè)細(xì)胞骨架的中間絲（intermediate filament），其直徑平均為10nm，介于微管和微絲之間。中間絲有五類：即神經(jīng)原纖維、膠質(zhì)原纖維酸性蛋白、結(jié)蛋白（desmin）、波形蛋白（vimentin）和角蛋白（keratin）。它們各有生物化學(xué)和免疫學(xué)特性，并分別存在于不同類型的細(xì)胞中，故具有相對(duì)的特異性，可用來(lái)協(xié)助診斷相應(yīng)的神經(jīng)細(xì)胞、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞、橫紋肌和平滑肌、間葉組織和上皮細(xì)胞來(lái)源的腫瘤。利用激素和激素受體的特異性結(jié)合，還可以對(duì)乳腺癌等激素依賴性腫瘤的雌激素受體、孕激素受體的水平進(jìn)行免疫組化測(cè)定。雌激素受體陽(yáng)性者對(duì)于內(nèi)分泌治療的效果較好，預(yù)后也優(yōu)于受體陰性的病人。

目前能用于腫瘤輔助診斷和鑒別診斷的抗體已不勝枚舉。由于經(jīng)驗(yàn)的積累，過(guò)去認(rèn)為在診斷某些腫瘤上具有特異性的抗體也不是那樣特異了。因此在判斷結(jié)果時(shí)必須緊密地結(jié)合形態(tài)學(xué)和臨床改變。

2．電子顯微鏡 檢查迄今尚未發(fā)現(xiàn)可據(jù)以診斷腫瘤和惡性腫瘤的特異性的超微結(jié)構(gòu)改變。因此要鑒別是否為腫瘤和腫瘤的良惡性仍主要靠光鏡觀察。但電鏡在確定腫瘤細(xì)胞的分化程度，鑒別腫瘤的類型和組織發(fā)生上可起重要作用。例如鑒別分化差的癌及肉瘤；區(qū)分各種惡性小圓細(xì)胞腫瘤，如神經(jīng)母細(xì)胞瘤、Ewing肉瘤、胚胎性橫紋肌肉瘤、惡性淋巴瘤及未分化小細(xì)胞癌。

在電鏡下，癌細(xì)胞之間常見(jiàn)較多的橋粒連接或橋粒樣連接，因而可與肉瘤相區(qū)別。在惡性小圓細(xì)胞腫瘤中，各類腫瘤也有其超微結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，如神經(jīng)母細(xì)胞瘤常見(jiàn)大量樹(shù)狀細(xì)胞突，在瘤細(xì)胞體及胞突中均可查見(jiàn)微管和神經(jīng)分泌顆粒；Ewing肉瘤的瘤細(xì)胞常分化差，胞漿內(nèi)細(xì)胞器很少，但以大量糖原沉積為其特點(diǎn)：胚胎性橫紋肌肉瘤可見(jiàn)由肌原纖維和Z帶構(gòu)成的發(fā)育不良的肌節(jié)；小細(xì)胞癌常可見(jiàn)細(xì)胞間連接和胞漿內(nèi)神經(jīng)分泌顆粒；惡性淋巴瘤除可見(jiàn)發(fā)育不同階段淋巴細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)特點(diǎn)外，不見(jiàn)細(xì)胞連接、神經(jīng)分泌顆粒、樹(shù)狀胞突和糖原沉積，從而可與其他小圓細(xì)胞腫瘤區(qū)別。

3．流式細(xì)胞術(shù)（flow cytometry）流式細(xì)胞術(shù)是近年來(lái)發(fā)展起來(lái)的一種快速定量分析細(xì)胞的新技術(shù)，目前已廣泛用于腫瘤研究，特別是應(yīng)用于瘤細(xì)胞DNA含量的檢測(cè)。許多資料表明，實(shí)體惡性腫瘤的DNA倍體大多為非整倍體或多倍體，所有良性病變都是二倍體。檢測(cè)異常DNA含量不但可作為惡性腫瘤的標(biāo)志之一，且可反映腫瘤的惡性程度及生物學(xué)行為。

4．圖像分析技術(shù) 病理形態(tài)學(xué)的觀察基本上是定性的，缺乏精確而更為客觀的定量標(biāo)準(zhǔn)。圖像分析技術(shù)（image　analysis）的出現(xiàn)彌補(bǔ)了這個(gè)缺點(diǎn)。隨著電子計(jì)算機(jī)技術(shù)的發(fā)展，形態(tài)定量技術(shù)已從二維空間向三維空間發(fā)展。在腫瘤病理方面圖像分析主要應(yīng)用于核形態(tài)參數(shù)的測(cè)定（區(qū)別癌前病變和癌；區(qū)別腫瘤的良惡性；腫瘤的組織病理分級(jí)及判斷預(yù)后等），DNA倍體的測(cè)定，顯色反應(yīng)（如免疫組織化學(xué)）的定量等方面。

5．分子生物學(xué)技術(shù) 十余年來(lái)分子生物學(xué)腫瘤研究領(lǐng)域引起了一場(chǎng)革命。重組DNA技術(shù)、核酸分子雜交技術(shù)、聚合酶鏈反應(yīng)（polymerase chain reaction，PCR）和DNA測(cè)序等新技術(shù)在腫瘤的基因分析和基因診斷上已經(jīng)開(kāi)始應(yīng)用。例如對(duì)惡性淋巴瘤，利用Southern印跡雜交技術(shù)和 PCR方法，可以對(duì)樣本淋巴組織中是否存在單克隆性的增生做出判斷，從而協(xié)助形態(tài)學(xué)診斷。這些技術(shù)還被用于腫瘤的病因和發(fā)病學(xué)研究。