抗體滴度
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抗體滴度定義為:A值高于生理鹽水對(duì)照組值加2倍對(duì)照組標(biāo)準(zhǔn)差的最高稀釋度.其中類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎滑膜組織中Vβ亞家族之間表達(dá)的均衡性最差,Vβ6、Vβ17與Vβ22為其優(yōu)勢(shì)亞群
目錄 |
源自
源自: 中國(guó)強(qiáng)毒鉤端螺旋體膜蛋白基因的真核表達(dá)... 《中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志》 2002年 晏菊芳,鮑朗,胡昌華,李學(xué)敏,張會(huì)東
文章摘要
來(lái)源文章摘要：目的 檢測(cè)含有強(qiáng)毒賴型鉤體OmpL1外膜蛋白基因的 2個(gè)重組質(zhì)粒pBC OmpL1和pcDNA3 OmpL1在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中的表達(dá) ,及其作為DNA疫苗誘導(dǎo)小鼠體液免疫應(yīng)答的效果。方法 采用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法 ,以重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染COS7細(xì)胞 ,通過(guò)抗性標(biāo)志篩選穩(wěn)定轉(zhuǎn)染入質(zhì)粒的細(xì)胞 ,RT PCR和Westernblot檢測(cè)被轉(zhuǎn)染細(xì)胞OmpL1基因的表達(dá)情況。然后 ,將重組質(zhì)粒以肌注法免疫BALB c小鼠 ,每 2周 1次 ,共 3次 ,ELISA檢測(cè)小鼠的體液免疫應(yīng)答水平。結(jié)果 RT PCR結(jié)果顯示 ,重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組在約 1kb處出現(xiàn)特異的擴(kuò)增帶 ;Westernblot檢測(cè)顯示 ,重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組總蛋白樣品在相對(duì)分子質(zhì)量 (Mr)為 33.5× 10 3 處出現(xiàn)特異的蛋白帶 ,而空質(zhì)粒載體轉(zhuǎn)染組均沒(méi)有此相應(yīng)的DNA或蛋白質(zhì)條帶。兩質(zhì)粒第 2次免疫小鼠 2周后 ,10 0 μg重組質(zhì)粒pBC OmpL1和pcDNA3 OmpL1DNA免疫組產(chǎn)生了效價(jià)為 1 196 83的高滴度抗體 ,注射 5 0 μgpcDNA3 OmpL1+5 0 μgpcDNA3的小鼠產(chǎn)生滴度為 1 6 5 6 1較高的抗...
檢測(cè)方法
檢測(cè)方法同前[11].A450處測(cè)定光吸收值.將抗體滴度定義為:實(shí)驗(yàn)組和陰性對(duì)照組光吸收比值≥2.0時(shí)最大的血清稀釋倍數(shù)
源自: 佐劑DDA和MPL對(duì)提高結(jié)核桿菌組合D... 《生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展》 2005年 余大海,蔡宏,朱玉賢
來(lái)源文章
來(lái)源文章摘要：編碼結(jié)核桿菌3種抗原Ag85B,MPT64,MPT83的基因片段插入真核表達(dá)載體作為組合疫苗免疫小鼠,DDA和MPL作為佐劑分別提高了此三價(jià)苗的免疫原性和免疫保護(hù)效果,且相比之下DDA優(yōu)于MPL.添加DDA后,Ag85B,MPT64,MPT83抗原特異的IFN-γ含量分別為(265.37± 79.2)U/ml,(185.31±58.3)U/ml,(108.13±54.4)U/ml,分別比非佐劑組的高16U/ml,45U/ml和 2U/ml,與MPL組3種抗原特異性IFN-γ的含量無(wú)顯著差異.IL-4的含量在各組中無(wú)顯著差異.攻毒后細(xì)菌計(jì)數(shù)結(jié)果顯示,添加佐劑的三價(jià)苗組小鼠的肺臟和脾臟的載菌量分別比空載體組降低了2￣3個(gè)數(shù)量級(jí),且佐劑DDA組顯著優(yōu)于佐劑MPL組和未加佐劑組.病理切片結(jié)果與載菌量數(shù)據(jù)相一致,添加佐劑組,特別是DDA組小鼠肺部淋巴細(xì)胞相對(duì)減少,巨噬細(xì)胞增多.因此,DDA作為佐劑能顯著提高核酸疫苗的免疫效率,佐劑MPL不能提高結(jié)核桿菌多價(jià)核酸疫苗的免疫效率.
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