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恒化器

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微型恒化器

一種微生物連續(xù)培養(yǎng)器。它以恒定的速度流出培養(yǎng)液,使容器中的微生物生長繁殖始終低于最快生長速度。這種容器反映的是培養(yǎng)基化學(xué)環(huán)境恒定。而恒濁器反映的是細(xì)胞濁度(濃度)的恒定。

目錄

簡介

連續(xù)培養(yǎng)基(即恒化器)是由一個與水浴相連的水膜包圍著的,溫度(恒定)控制在20℃的夾層(雙壁)玻璃容器(管)構(gòu)成的.

將微生物或動植物的細(xì)胞在一定量的培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)的一種方法。是連續(xù)培養(yǎng)的對應(yīng)詞。

分批培養(yǎng)所培養(yǎng)的細(xì)胞,通常是經(jīng)過停止期、對數(shù)期、靜止期的生長過程。在培養(yǎng)過程中,常有因培養(yǎng)基成分、細(xì)胞密度等發(fā)生變化,使細(xì)胞環(huán)境不能保持一定的欠缺,但所使用裝置和方法均較連續(xù)培養(yǎng)法簡便,所以被廣泛使用。

恒化器培養(yǎng)微生物不經(jīng)過“四個階段”,菌群基本是在對數(shù)生長期旺盛生長,產(chǎn)量很大。  

連續(xù)培養(yǎng)

微生物的連續(xù)培養(yǎng)( continuous culture )是相對于分批培養(yǎng)而言的。連續(xù)培養(yǎng)是指在深入研究分批培養(yǎng)中生長曲線形成的內(nèi)在機制的基礎(chǔ)上,開放培養(yǎng)系統(tǒng),不斷補充營養(yǎng)液、解除抑制因子、優(yōu)化生長代謝環(huán)境的培養(yǎng)方式。由于培養(yǎng)系統(tǒng)的相對開放性,因此,連續(xù)培養(yǎng)也稱為開放培養(yǎng)( openning culture )。  

特點與優(yōu)勢

連續(xù)培養(yǎng)的顯著特點與優(yōu)勢是,它可以根據(jù)研究者的目的,在一定程度上,人為控制典型生長曲線中的某個時期,使之縮短或延長時間,使某個時期的細(xì)胞加速或降低代謝速率,從而大大提高培養(yǎng)過程的人為可控性和效率。連續(xù)培養(yǎng)模式應(yīng)用于發(fā)酵工業(yè)則稱之為連續(xù)發(fā)酵( continuous fermentation )。

在連續(xù)培養(yǎng)過程中,它可以根據(jù)研究者的目的與研究對象不同,分別采用不同的連續(xù)培養(yǎng)方法。常用的連續(xù)培養(yǎng)方法有恒濁法與恒化法兩類?! ?/p>

恒濁法

所謂恒濁法是以培養(yǎng)器中微生物細(xì)胞的密度為監(jiān)控對象,用光電控制系統(tǒng)來控制流入培養(yǎng)器的新鮮培養(yǎng)液的流速,同時使培養(yǎng)器中的含有細(xì)胞與代謝產(chǎn)物的培養(yǎng)液也以基本恒定的流速流出,從而使培養(yǎng)器中的微生物在保持細(xì)胞密度基本恒定的條件下進(jìn)行培養(yǎng)的一種連續(xù)培養(yǎng)方式。用于恒濁培養(yǎng)的培養(yǎng)裝置稱為恒濁器( turbidostat )。連續(xù)培養(yǎng)裝置(發(fā)酵罐, fermenter )用恒濁法連續(xù)培養(yǎng)微生物,可控制微生物在最高生長速率與最高細(xì)胞密度的水平上生長繁殖,達(dá)到高效率培養(yǎng)的目的。目前在發(fā)酵工業(yè)上有多種微生物菌體的生產(chǎn)就是根據(jù)這一原理,用大型恒濁發(fā)酵器進(jìn)行恒濁法連續(xù)發(fā)酵生產(chǎn)的。與菌體相平衡的微生物代謝產(chǎn)物的生產(chǎn)也可采用恒濁法連續(xù)發(fā)酵生產(chǎn)?! ?/p>

恒化法

恒化法是監(jiān)控對象不同于恒濁法的另一種連續(xù)培養(yǎng)方式。恒化法是通過控制培養(yǎng)基中營養(yǎng)物,主要是生長限制因子的濃度,來調(diào)控微生物生長繁殖與代謝速度的連續(xù)培養(yǎng)方式。用于恒化培養(yǎng)的裝置稱為恒化器( chemostat 或 bactogen )。恒化連續(xù)培養(yǎng)往往控制微生物在低于最高生長速率的條件下生長繁殖。恒化連續(xù)培養(yǎng)在研究微生物利用某種底物進(jìn)行代謝的規(guī)律方面被廣泛采用。因此,它是微生物營養(yǎng)、生長、繁殖、代謝和基因表達(dá)與調(diào)控等基礎(chǔ)與應(yīng)用基礎(chǔ)研究的重要技術(shù)手段?! ?/p>

應(yīng)用范圍

分批培養(yǎng)與連續(xù)培養(yǎng)的分類是相對的。無論是基礎(chǔ)研究還是在發(fā)酵工業(yè)生產(chǎn)實踐中,為了達(dá)到某種特殊目的或提高培養(yǎng)效率,常常采取兩種方法加以綜合的培養(yǎng)方式。如在金霉素、四環(huán)素抗生素發(fā)酵生產(chǎn)中,在細(xì)胞群體生長進(jìn)入穩(wěn)定期,抗生素開始大量合成時進(jìn)行補料,適當(dāng)增加發(fā)酵液中合成四環(huán)類抗生素的底物量和維持細(xì)胞生存所需要的低微濃度的營養(yǎng)物,使細(xì)胞在非生長繁殖狀態(tài)下合成抗生素的持續(xù)時間延長,從而達(dá)到提高單位發(fā)酵液中抗生素總量(效價)之目的。 在這種細(xì)胞生長繁殖與目的產(chǎn)物合成處于階段分明的不同時期工藝技術(shù),要大幅度地延長目的產(chǎn)物合成期是難以做到的。因為,隨著對細(xì)胞自身具有一定毒害作用的抗生素在細(xì)胞內(nèi)外環(huán)境中濃度的提高,其它對細(xì)胞生存不利的代謝產(chǎn)物在環(huán)境中的量也在同時增加,會制約細(xì)胞長時間維持抗生素合成的高效率。通過補料,適當(dāng)增加營養(yǎng),可以延緩了細(xì)胞衰老自溶崩潰,但是,應(yīng)該指出細(xì)胞走向終止代謝與死亡的方向并沒有改變,進(jìn)程并沒有阻斷。也即通過調(diào)控營養(yǎng)物配方與補料方式,不可能達(dá)到細(xì)胞不衰老而無限延長抗生素高效率合成時間。這與人類求長生不老之術(shù)不可能達(dá)到同理。因此,基于上述理由, 金霉素與四環(huán)素發(fā)酵生產(chǎn)周期不長,一般在 110~150 小時。一罐發(fā)酵成熟后即行放罐,接著開始另一罐的發(fā)酵,批次明顯。這種類型的發(fā)酵方式,既不是嚴(yán)格意義的分批培養(yǎng)方式,也不是嚴(yán)格意義的連續(xù)培養(yǎng)方式,一般稱之為補料分批培養(yǎng)或半連續(xù)培養(yǎng),在發(fā)酵工業(yè)上也稱為半連續(xù)發(fā)酵。這種半連續(xù)發(fā)酵方式在當(dāng)代發(fā)酵工業(yè)上應(yīng)用最為廣泛。

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